polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس کیا ہے؟

Polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس

جیل الیکٹروفورسس حیاتیاتی شعبوں میں لیبارٹریوں میں ایک بنیادی تکنیک ہے، جو ڈی این اے، آر این اے اور پروٹین جیسے میکرو مالیکیولز کو الگ کرنے کی اجازت دیتی ہے۔مختلف علیحدگی میڈیا اور میکانزم ان مالیکیولز کے ذیلی سیٹوں کو ان کی جسمانی خصوصیات کا استحصال کرتے ہوئے زیادہ مؤثر طریقے سے الگ کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔خاص طور پر پروٹین کے لیے، پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس (PAGE) اکثر انتخاب کی تکنیک ہوتی ہے۔

PAGE ایک تکنیک ہے جو میکرو مالیکیولز جیسے پروٹین کو ان کی الیکٹروفوریٹک موبلٹی کی بنیاد پر الگ کرتی ہے، یعنی تجزیہ کاروں کی مخالف چارج کے الیکٹروڈ کی طرف بڑھنے کی صلاحیت۔PAGE میں، اس کا تعین مالیکیول کے چارج، سائز (سالماتی وزن) اور شکل سے ہوتا ہے۔تجزیہ کار پولی کریلامائڈ جیل میں بننے والے سوراخوں سے گزرتے ہیں۔ڈی این اے اور آر این اے کے برعکس، پروٹین انچارج میں شامل امینو ایسڈز کے مطابق مختلف ہوتے ہیں، جو ان کے چلانے کے طریقے پر اثر انداز ہوتے ہیں۔امینو ایسڈ کے تار ثانوی ڈھانچے بھی تشکیل دے سکتے ہیں جو ان کے ظاہری سائز پر اثر انداز ہوتے ہیں اور اس کے نتیجے میں وہ چھیدوں سے کیسے گزر سکتے ہیں۔اس لیے بعض اوقات یہ ضروری ہو سکتا ہے کہ الیکٹروفورسس سے پہلے پروٹینوں کو قطعی شکل دے دی جائے اگر سائز کا زیادہ درست تخمینہ درکار ہو۔

SDS صفحہ

Sodium-dodecyl سلفیٹ polyacrylamide gel electrophoresis ایک تکنیک ہے جو ماس 5 سے 250 kDa کے پروٹین مالیکیولز کو الگ کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہے۔پروٹین کو مکمل طور پر ان کے مالیکیولر وزن کی بنیاد پر الگ کیا جاتا ہے۔سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ، ایک اینیونک سرفیکٹنٹ، جیلوں کی تیاری میں شامل کیا جاتا ہے جو پروٹین کے نمونوں کے اندرونی چارجز کو چھپاتا ہے اور انہیں بڑے پیمانے پر تناسب کے برابر چارج دیتا ہے۔آسان الفاظ میں، یہ پروٹینوں کی کمی کرتا ہے اور انہیں منفی چارج دیتا ہے۔

مقامی صفحہ

Native PAGE ایک تکنیک ہے جو پروٹین کی علیحدگی کے لیے غیر منقطع جیل کا استعمال کرتی ہے۔ایس ڈی ایس پیج کے برعکس، جیل کی تیاری میں کوئی ڈینیچرنگ ایجنٹ شامل نہیں کیا جاتا ہے۔نتیجے کے طور پر، پروٹین کی علیحدگی پروٹین کے چارج اور سائز کی بنیاد پر ہوتی ہے.اس تکنیک میں، پروٹین کی تشکیل، فولڈنگ اور امینو ایسڈ کی زنجیریں وہ عوامل ہیں جن پر علیحدگی کا انحصار ہوتا ہے۔اس عمل میں پروٹینز کو نقصان نہیں پہنچتا ہے، اور علیحدگی کی تکمیل کے بعد دوبارہ حاصل کیا جا سکتا ہے۔

پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس (PAGE) کیسے کام کرتا ہے؟

PAGE کا بنیادی اصول یہ ہے کہ تجزیہ کاروں کو الیکٹرک کرنٹ کا استعمال کرتے ہوئے پولی کریلامائڈ جیل کے سوراخوں سے گزر کر الگ کیا جائے۔اس کو حاصل کرنے کے لیے، امونیم پرسلفیٹ (اے پی ایس) کے اضافے کے ذریعے ایکریلامائڈ – بیساکریلامائڈ مکس کو پولیمرائز کیا جاتا ہے۔رد عمل، جو tetramethylethylenediamine (TEMED) کے ذریعے اتپریرک ہوتا ہے، چھیدوں کے ساتھ ایک جال جیسا ڈھانچہ بناتا ہے جس کے ذریعے تجزیہ کار حرکت کر سکتے ہیں (شکل 2)۔جیل میں شامل کل ایکریلامائڈ کا فیصد جتنا زیادہ ہوگا، سوراخ کا سائز اتنا ہی چھوٹا ہوگا، اس لیے چھوٹے پروٹین جو گزرنے کے قابل ہوں گے۔acrylamide اور bisacrylamide کا تناسب سوراخ کے سائز کو بھی متاثر کرے گا لیکن اسے اکثر مستقل رکھا جاتا ہے۔چھوٹے تاکوں کے سائز اس رفتار کو بھی کم کرتے ہیں جس پر چھوٹے پروٹین جیل کے ذریعے حرکت کرنے کے قابل ہوتے ہیں، ان کی ریزولوشن کو بہتر بناتے ہیں اور کرنٹ لگنے پر انہیں تیزی سے بفر میں جانے سے روکتے ہیں۔

Polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس کے لئے سامان

جیل الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر)
polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس (PAGE) کے لیے جیل ٹینک ایگرز جیل ٹینک سے مختلف ہے۔ایگروز جیل ٹینک افقی ہے، جبکہ پیج ٹینک عمودی ہے۔عمودی الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر) کے ذریعے، ایک پتلی جیل (عام طور پر 1.0 ملی میٹر یا 1.5 ملی میٹر) کو شیشے کی دو پلیٹوں کے درمیان ڈالا جاتا ہے اور اس طرح نصب کیا جاتا ہے کہ جیل کا نچلا حصہ ایک چیمبر میں بفر میں ڈوب جاتا ہے اور اوپر والا حصہ بفر میں ڈوب جاتا ہے۔ ایک اور چیمبر میں.جب کرنٹ لگایا جاتا ہے تو، بفر کی تھوڑی سی مقدار جیل کے ذریعے اوپر والے چیمبر سے نیچے والے چیمبر میں منتقل ہوتی ہے۔اس بات کو یقینی بنانے کے لیے مضبوط کلیمپس کے ساتھ کہ اسمبلی ایک سیدھی پوزیشن میں رہے، آلات تیز رفتار جیل چلانے کی سہولت فراہم کرتے ہیں جس کے نتیجے میں الگ الگ بینڈ ہوتے ہیں۔

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس سیلز (ٹینک/چیمبرز) کے سائز کی ایک رینج تیار کرتی ہے۔ماڈل DYCZ-20C اور DYCZ-20G ڈی این اے کی ترتیب کے تجزیہ کے لیے عمودی الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر) ہیں۔کچھ عمودی الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر) بلوٹنگ سسٹم کے ساتھ مطابقت رکھتے ہیں، جیسے ماڈل DYCZ-24DN، DYCZ-25D اور DYCZ-25E مغربی بلوٹنگ سسٹم کے ماڈل DYCZ-40D، DYCZ-40G اور DYCZ-40F کے ساتھ مطابقت رکھتے ہیں، جو پروٹین کے مالیکیول کو جیل سے جھلی میں منتقل کرنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔SDS-PAGE الیکٹروفورسس کے بعد، ویسٹرن بلاٹنگ پروٹین کے مرکب میں ایک مخصوص پروٹین کا پتہ لگانے کی ایک تکنیک ہے۔آپ تجرباتی ضروریات کے مطابق ان بلوٹنگ سسٹم کا انتخاب کر سکتے ہیں۔

الیکٹروفورسس پاور سپلائی
جیل چلانے کے لیے بجلی فراہم کرنے کے لیے، آپ کو الیکٹروفورسس پاور سپلائی کی ضرورت ہوگی۔Liuyi بائیو ٹیکنالوجی میں ہم تمام ایپلی کیشنز کے لیے الیکٹروفورسس پاور سپلائیز کی ایک رینج فراہم کرتے ہیں۔ہائی مستحکم وولٹیج اور کرنٹ کے ساتھ DYY-12 اور DYY-12C ماڈل ہائی وولٹیج کی ضرورت الیکٹروفورسس کو پورا کر سکتے ہیں۔اس میں اسٹینڈ، ٹائمنگ، VH اور مرحلہ وار ایپلی کیشن کا کام ہے۔وہ IEF اور DNA کی ترتیب الیکٹروفورسس ایپلی کیشن کے لیے مثالی ہیں۔عام پروٹین اور DNA الیکٹروفورسس ایپلی کیشن کے لیے، ہمارے پاس DYY-2C، DYY-6C، DYY-10، اور اسی طرح کا ماڈل ہے، جو الیکٹروفورسس سیلز (ٹینکس/چیمبرز) کے ساتھ گرم سیلز پاور سپلائیز بھی ہیں۔یہ درمیانی اور کم وولٹیج الیکٹروفورسس ایپلی کیشنز کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں، جیسے کہ اسکول لیب کے استعمال، ہسپتال کی لیب وغیرہ کے لیے۔بجلی کی فراہمی کے مزید ماڈلز، براہ کرم ہماری ویب سائٹ ملاحظہ کریں۔

Liuyi برانڈ کی چین میں 50 سال سے زیادہ کی تاریخ ہے اور کمپنی پوری دنیا میں مستحکم اور اعلیٰ معیار کی مصنوعات فراہم کر سکتی ہے۔سالوں کی ترقی کے ذریعے، یہ آپ کی پسند کے قابل ہے!

ہمارے بارے میں مزید معلومات کے لیے، براہ کرم ہم سے ای میل کے ذریعے رابطہ کریں۔[ای میل محفوظ] or [ای میل محفوظ].

پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس کیا ہے کے حوالے؟
1. کیرن اسٹیورڈ پی ایچ ڈی پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس، یہ کیسے کام کرتا ہے، تکنیک کی مختلف حالتیں، اور اس کے استعمال