Electrophoresis کے لئے Agarose جیل کی تیاری
نوٹ: ہمیشہ ڈسپوزایبل دستانے پہنیں!
مرحلہ وار ہدایات
Agarose پاؤڈر وزن:u0.3 گرام ایگروز پاؤڈر (30 ملی لیٹر سسٹم پر مبنی) کی پیمائش کرنے کے لیے وزنی کاغذ اور ایک الیکٹرانک بیلنس۔
TBST بفر کی تیاری:p100ml Erlenmeyer فلاسک میں 30ml 1x TBST بفر کو دوبارہ تیار کریں۔
Agarose پاؤڈر کو تحلیل کرنا:pہمارے ایگرز پاؤڈر کو TBST بفر میں ڈالیں اور اچھی طرح ہلائیں۔انہیں اندر ڈالومائیکرو ویو اور گرمی تک (عام طور پر 50 سیکنڈ کے لیے، ایلومینیم ورق سے ڈھکا ہوا) جب تک کہ مکمل طور پر تحلیل نہ ہو جائے۔
نیوکلیز کو ٹھنڈا کرنا اور شامل کرنا:uمکسچر کو مائکروویو سے نکالنے کے لیے دستانے لگائیں اور اسے ٹھنڈے پانی میں تھوڑا سا ٹھنڈا ہونے دیں جب تک کہ یہ گرم نہ ہو (تقریباً 60 ° C)۔ اچھی طرح مکس کرنے کے لیے ہلاتے ہوئے 2µl نیوکلیز (Eb متبادل) شامل کریں۔
جیل مولڈ کی تیاری:
- Cدبلی اور خشکجیل ٹرے اور جیل کاسٹنگ ڈیوائسالیکٹروفورسس ٹینک کا۔
- Pجیل لیسٹرےاندرونی ٹینک میں اور کنگھی کو ایک مقررہ پوزیشن پر داخل کریں۔
- ایگرز جیل کے محلول کو مکس کریں، تقریباً 65 ڈگری سینٹی گریڈ پر ٹھنڈا کریں، اور اسے احتیاط سے اس پر ڈال دیں۔جیل ٹرےمیںجیل کاسٹنگ ڈیوائس، اسے آہستہ آہستہ پھیلائیں جب تک کہ یہ شیشے کی پلیٹ پر ایک برابر جیل کی تہہ نہ بنا لے۔
- اسے کمرے کے درجہ حرارت پر بیٹھنے دیں جب تک کہ جیل مکمل طور پر مضبوط نہ ہوجائے۔
- آہستہ سے کنگھی کو عمودی طور پر ہٹائیں اور ٹیپ کو ہٹا دیں۔
- جیل رکھیںٹرےالیکٹروفورسس ٹینک میں
اہم: اس بات کو یقینی بنائیں کہ کنگھی کے دانتوں کی جگہ پر ہوا کے بلبلے نہیں ہیں۔ مائع کی سطح لہروں کے بغیر ہموار ہونی چاہئے۔
جیل چلانا
جیل لوڈ ہو رہا ہے۔
جیل کے مضبوط ہونے کے بعد، اسے الیکٹروفورسس ٹینک میں رکھیں اور الیکٹروفورسس بفر کو اس وقت تک ڈالیں جب تک کہ جیل ڈوب نہ جائے۔
نمونے کی تیاری
- ریفریجریٹر سے مارکر اور لوڈنگ بفر لیں۔
- نمونوں میں 6µl لوڈنگ بفر شامل کریں اور اچھی طرح مکس کریں۔
- مائیکرو پیپیٹ کا استعمال کرتے ہوئے، نمونوں کو آہستہ آہستہ جیل کے بڑے کنوؤں میں لوڈ کریں (ہوشیار رہیں کہ جیل کو پنکچر نہ کریں اور ہوا کے بلبلوں سے بچنے کے لیے پورے حجم کو نہ پھیلائیں)۔
- مارکر کو کسی بھی چھوٹے کنویں میں لوڈ کریں (اس کی پوزیشن یاد رکھیں)۔
الیکٹروفورسس شروع کرنا
- الیکٹروفورسس ٹینک کو ڈھانپیں اور جیل لوڈ کرنے کے فوراً بعد الیکٹروفورسس شروع کریں۔
- وولٹیج کو 60-100V پر سیٹ کریں۔ نمونے منفی الیکٹروڈ (سیاہ) سے مثبت الیکٹروڈ (سرخ) میں منتقل ہو جائیں گے۔
- زیادہ وولٹیج ایگروز جیل کی مؤثر علیحدگی کی حد کو کم کرتا ہے۔
- جب بروموفینول بلیو ڈائی جیل پلیٹ کے نیچے کے کنارے سے تقریباً 1 سینٹی میٹر تک پہنچ جائے تو الیکٹروفورسس کو روکیں۔
نتائج کا مشاہدہ
بینڈوں کو الگ کرنے کے بعد، الیکٹروفورسس کو روکیں، جیل کو باہر نکالیں، اور براہ راست اس کا پتہ لگائیں اور تصویر بنائیں۔
بینڈوں کی تصویر کشی اور مشاہدہ کرنے کے لیے جیل امیجنگ سسٹم کا استعمال کریں (چیک کریں کہ آیا مارکر یا نمونوں کے لیے کوئی بینڈ موجود ہیں)۔
اپنے جیل بینڈ کا نقشہ حاصل کرنے کے بعد، مارکر تلاش کریں۔ مارکر کی بنیاد پر، آپ ٹارگٹ بینڈ کا تعین کر سکتے ہیں!
بیجنگ لیوئی بائیوٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ (لیوئی بائیوٹیکنالوجی) 50 سال سے زیادہ عرصے سے الیکٹروفورسس مصنوعات تیار کر رہی ہے۔ ہم اپنے افقی الیکٹروفورسس سسٹم کو یہاں پیش کرتے ہیں۔آگروز جیلالیکٹروفورسسمنتخب کریں۔افقی الیکٹروفورسس سسٹمبائیو ٹیکنالوجی کی صنعت میں آپ کی تحقیق میں مدد کے لیے آپ کے جیل الیکٹروفورسس کے تجربے کے لیے بیجنگ لیوئی سے۔
ہم چھوٹے کاسٹ کرنے اور چلانے کے لیے افقی الیکٹروفورسس ٹینک کے مختلف ماڈل پیش کرتے ہیں۔agaroseبڑے کرنے کے لئے جیلagaroseجیل
افقی ڈوبی جیل الیکٹروفورسس یونٹ کے لیے سلیکشن گائیڈ
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) نے ہماری اپنی پیشہ ور تکنیکی ٹیم اور R&D سنٹر کے ساتھ 50 سال سے زائد عرصے سے الیکٹروفورسس آلات کی تیاری میں مہارت حاصل کی ہے۔ ہمارے پاس ڈیزائن سے لے کر معائنہ تک قابل اعتماد اور مکمل پروڈکشن لائن، اور گودام کے ساتھ ساتھ مارکیٹنگ سپورٹ ہے۔ ہماری اہم مصنوعات الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر)، الیکٹروفورسس پاور سپلائی، بلیو ایل ای ڈی ٹرانسلومینیٹر، یووی ٹرانسیلومینیٹر، جیل امیج اینڈ اینالیسس سسٹم وغیرہ ہیں۔ ہم لیبارٹری کے لیے پی سی آر انسٹرومنٹ، ورٹیکس مکسر اور سینٹری فیوج جیسے لیب کے آلات بھی فراہم کرتے ہیں۔
اگر آپ کے پاس ہماری مصنوعات کی خریداری کا کوئی منصوبہ ہے، تو براہ کرم ہم سے رابطہ کرنے میں سنکوچ نہ کریں۔ آپ ہمیں ای میل پر پیغام بھیج سکتے ہیں۔[ای میل محفوظ]یا[ای میل محفوظ]، یا براہ کرم ہمیں +86 15810650221 پر کال کریں یا Whatsapp +86 15810650221، یا Wechat: 15810650221 شامل کریں۔
براہ کرم Whatsapp یا WeChat پر شامل کرنے کے لیے QR کوڈ اسکین کریں۔
پوسٹ ٹائم: اگست 09-2024