جیل الیکٹروفورسس کو بہتر بنانا: نمونہ والیوم، وولٹیج اور وقت کے لیے بہترین طریقے

تعارف

جیل الیکٹروفورسس سالماتی حیاتیات میں ایک بنیادی تکنیک ہے، جو بڑے پیمانے پر پروٹین، نیوکلک ایسڈز، اور دیگر میکرو مالیکیولز کی علیحدگی کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ نمونے کے حجم، وولٹیج، اور الیکٹروفورسس کے وقت کا مناسب کنٹرول درست اور تولیدی نتائج حاصل کرنے کے لیے بہت ضروری ہے۔ہمارے لیب کے ساتھی پیشکش کرتے ہیں۔SDS-PAGE جیل الیکٹروفورسس کے دوران ان پیرامیٹرز کو منظم کرنے کے بہترین طریقے۔

بیجنگ لیوئی بائیوٹیکنالوجی جیل الیکٹروفورسس مصنوعات

نمونہ والیوم: مستقل مزاجی کو یقینی بنانا

SDS-PAGE الیکٹروفورسس کو انجام دیتے وقت، نمونے کا حجم ایک اہم عنصر ہے جو آپ کے نتائج کے حل کو نمایاں طور پر متاثر کر سکتا ہے۔ عام طور پر 10 µL کل پروٹین فی کنواں لوڈ کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔ مستقل مزاجی کو یقینی بنانے اور ملحقہ کنوؤں کے درمیان نمونے کے پھیلاؤ کو روکنے کے لیے، کسی بھی خالی کنویں میں 1x لوڈنگ بفر کے برابر حجم کو لوڈ کرنا ضروری ہے۔ یہ احتیاط ہمسایہ گلیوں میں نمونوں کے پھیلاؤ کو روکنے میں مدد کرتی ہے، جو کنواں خالی رہنے کی صورت میں ہو سکتی ہے۔

اپنے نمونے لوڈ کرنے سے پہلے، ہمیشہ ایک کنویں میں مالیکیولر ویٹ مارکر شامل کرکے شروع کریں۔ یہ الیکٹروفورسس کے بعد پروٹین کے سائز کی آسانی سے شناخت کرنے کی اجازت دیتا ہے۔

وولٹیج کنٹرول: رفتار اور ریزولوشن کو متوازن کرنا

الیکٹروفورسس کے دوران لگائی جانے والی وولٹیج براہ راست اس رفتار کو متاثر کرتی ہے جس سے نمونے جیل کے ذریعے منتقل ہوتے ہیں اور علیحدگی کے حل پر۔ SDS-PAGE کے لیے، 80V کے کم وولٹیج کے ساتھ شروع کرنے کا مشورہ دیا جاتا ہے۔ یہ ابتدائی کم وولٹیج نمونے کو آہستہ آہستہ اور یکساں طور پر منتقل کرنے کی اجازت دیتا ہے، جب وہ الگ کرنے والے جیل میں داخل ہوتے ہیں تو انہیں تیز بینڈ میں مرکوز کرتے ہیں۔

ایک بار جب نمونے مکمل طور پر الگ کرنے والے جیل میں داخل ہو جائیں تو، وولٹیج کو 120V تک بڑھایا جا سکتا ہے۔ یہ زیادہ وولٹیج ہجرت کو تیز کرتا ہے، اس بات کو یقینی بناتا ہے کہ پروٹین ان کے مالیکیولر وزن کے مطابق موثر طریقے سے الگ ہو جائیں۔ بروموفینول بلیو ڈائی فرنٹ کی پیشرفت کی نگرانی کرنا ضروری ہے، جو الیکٹروفورسس کی تکمیل کی طرف اشارہ کرتا ہے۔ 10-12% کی حراستی والے جیلوں کے لیے، عام طور پر 80-90 منٹ کافی ہوتے ہیں۔ تاہم، 15% جیلوں کے لیے، آپ کو رن ٹائم کو تھوڑا سا بڑھانے کی ضرورت پڑ سکتی ہے۔

ٹائم مینجمنٹ: یہ جاننا کہ کب رکنا ہے۔

جیل الیکٹروفورسس میں وقت ایک اور اہم عنصر ہے۔ جیل کو بہت لمبا یا بہت کم مدت تک چلانے سے سب سے زیادہ علیحدگی ہو سکتی ہے۔ بروموفینول بلیو ڈائی کی منتقلی ایک مفید اشارے ہے: جب یہ جیل کے نچلے حصے تک پہنچ جاتا ہے، تو یہ عام طور پر رن ​​کو روکنے کا وقت ہوتا ہے۔ معیاری جیلوں کے لیے، جیسے کہ 10-12%، تقریباً 80-90 منٹ کا الیکٹروفورسس کا دورانیہ عام طور پر کافی ہوتا ہے۔ زیادہ فیصد جیلوں کے لیے، جیسے 15%، رن ٹائم بڑھایا جانا چاہیے تاکہ پروٹین کی مکمل علیحدگی کو یقینی بنایا جا سکے۔

بفر مینجمنٹ: بفرز کو دوبارہ استعمال اور تیار کرنا

آپ کی لیبارٹری کی مخصوص شرائط پر منحصر ہے، الیکٹروفورسس بفر کو 1-2 بار دوبارہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، زیادہ سے زیادہ نتائج کے لیے، یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ تازہ 10x بفر تیار کریں اور استعمال سے پہلے اسے پتلا کریں۔ یہ یقینی بناتا ہے کہ بفر اپنی تاثیر کو برقرار رکھتا ہے، جس سے الیکٹروفورسس کے زیادہ قابل اعتماد نتائج برآمد ہوتے ہیں۔

بیجنگ لیوئی بائیوٹیکنالوجی جیل الیکٹروفورسس مصنوعات

نمونے کے حجم، وولٹیج اور الیکٹروفورسس کے وقت کو احتیاط سے کنٹرول کرکے، آپ اپنے جیل الیکٹروفورسس کے نتائج کی درستگی اور تولیدی صلاحیت کو نمایاں طور پر بہتر بنا سکتے ہیں۔ اپنے لیبارٹری کے کام میں ان بہترین طریقوں کو لاگو کرنے سے آپ کو واضح اور زیادہ واضح بینڈ حاصل کرنے میں مدد ملے گی، جس کے نتیجے میں بہاو تجزیہ کے لیے بہتر ڈیٹا حاصل ہو گا۔

اگر آپ کے پاس جیل الیکٹروفورسس کے تجربے کو بہتر بنانے کے مزید اچھے طریقے ہیں، تو ہم سے بات کرنے میں خوش آمدید!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) نے ہماری اپنی پیشہ ور تکنیکی ٹیم اور R&D سنٹر کے ساتھ 50 سال سے زائد عرصے سے الیکٹروفورسس آلات کی تیاری میں مہارت حاصل کی ہے۔ ہمارے پاس ڈیزائن سے لے کر معائنہ تک قابل اعتماد اور مکمل پروڈکشن لائن، اور گودام کے ساتھ ساتھ مارکیٹنگ سپورٹ ہے۔ ہماری اہم مصنوعات الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر)، الیکٹروفورسس پاور سپلائی، بلیو ایل ای ڈی ٹرانسلومینیٹر، یووی ٹرانسیلومینیٹر، جیل امیج اینڈ اینالیسس سسٹم وغیرہ ہیں۔ ہم لیبارٹری کے لیے پی سی آر انسٹرومنٹ، ورٹیکس مکسر اور سینٹری فیوج جیسے لیب کے آلات بھی فراہم کرتے ہیں۔

اگر آپ کے پاس ہماری مصنوعات کی خریداری کا کوئی منصوبہ ہے، تو براہ کرم ہم سے رابطہ کرنے میں سنکوچ نہ کریں۔ آپ ہمیں ای میل پر پیغام بھیج سکتے ہیں۔[ای میل محفوظ]یا[ای میل محفوظ]، یا براہ کرم ہمیں +86 15810650221 پر کال کریں یا Whatsapp +86 15810650221، یا Wechat: 15810650221 شامل کریں۔

براہ کرم Whatsapp یا WeChat پر شامل کرنے کے لیے QR کوڈ اسکین کریں۔