ڈی این اے الیکٹروفورسس عام مسائل

جیل الیکٹروفورسس ڈی این اے کے تجزیہ کے لیے سالماتی حیاتیات میں استعمال ہونے والے بڑے طریقوں میں سے ایک ہے۔ اس طریقہ کار میں ایک جیل کے ذریعے ڈی این اے کے ٹکڑوں کی منتقلی شامل ہے، جہاں انہیں سائز یا شکل کی بنیاد پر الگ کیا جاتا ہے۔ تاہم، کیا آپ نے اپنے الیکٹروفورسس کے تجربات کے دوران کبھی کسی غلطی کا سامنا کیا ہے، جیسے کہ ایگرز جیل پر سمیرڈ بینڈ، یا جیل پر کوئی بینڈ نہیں؟ ان غلطیوں کی وجہ کیا ہو سکتی ہے؟

ہمارے تکنیکی ماہرین نے آپ کے حوالہ کے لیے یہاں ٹربل شوٹنگ کے جوڑے کا خلاصہ کیا ہے۔

1. ایگروز جیل پر سمیرڈ بینڈ

●ڈی این اے خراب ہو گیا تھا۔ نیوکلیز آلودگی سے بچیں۔

● الیکٹروفورسس بفر تازہ نہیں ہے۔ الیکٹروفورسس بفر کے بار بار استعمال کے بعد، آئنک طاقت کم ہو جاتی ہے، اور اس کی پی ایچ ویلیو بڑھ جاتی ہے، اس لیے بفر کی صلاحیت کمزور ہو جاتی ہے، جو الیکٹروفورسس اثر کو متاثر کرتی ہے۔ الیکٹروفورسس بفر کو کثرت سے تبدیل کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

الیکٹروفورسس کے نامناسب حالات استعمال کیے گئے۔ وولٹیج کو 20 V/cm سے زیادہ نہ ہونے دیں، اور الیکٹروفورسس کے دوران درجہ حرارت <30° C برقرار رکھیں۔ وشال DNA اسٹرینڈ الیکٹروفورسس کے لیے، درجہ حرارت <15° C ہونا چاہیے۔ چیک کریں کہ الیکٹروفورسس بفر میں کافی بفر کی گنجائش ہے۔

● جیل پر بہت زیادہ ڈی این اے بھرا ہوا تھا۔ ڈی این اے کی مقدار کو کم کریں۔

● ڈی این اے میں بہت زیادہ نمک۔ ایڈوانس میں اضافی نمکیات کو دور کرنے کے لیے ایتھنول ورن کا استعمال کریں۔

● ڈی این اے پروٹین سے آلودہ تھا۔ اعلی درجے میں پروٹین کو دور کرنے کے لئے فینول نکالنے کا استعمال کریں.

● ڈی این اے کو منقطع کر دیا گیا تھا۔ الیکٹروفورسس سے پہلے گرم نہ کریں۔ بفر میں DNA کو 20 mM NaCl کے ساتھ پتلا کریں۔

2. بے ضابطگیوں DNA بینڈ کی منتقلی

● λHind III ٹکڑے کی COS سائٹ کی بحالی۔ الیکٹروفورسس سے پہلے ڈی این اے کو 65 ° C کے نیچے 5 منٹ کے لیے گرم کریں، اور پھر اسے برف کے یونٹ پر 5 منٹ کے لیے ٹھنڈا کریں۔

الیکٹروفورسس کے نامناسب حالات استعمال کیے گئے۔ وولٹیج کو 20 V/cm سے زیادہ نہ ہونے دیں، اور الیکٹروفورسس کے دوران درجہ حرارت <30° C برقرار رکھیں۔ چیک کریں کہ الیکٹروفورسس بفر میں کافی بفر کی گنجائش ہے۔

● ڈی این اے کو منقطع کر دیا گیا تھا۔ الیکٹروفورسس سے پہلے گرم نہ کریں۔ بفر میں DNA کو 20 mM NaCl کے ساتھ پتلا کریں۔

3. ایگروز جیل پر بیہوش یا کوئی ڈی این اے بینڈ نہیں ہے۔

● جیل پر بھری ہوئی DNA کی ناکافی مقدار یا ارتکاز تھا۔ ڈی این اے کی مقدار بڑھائیں۔ Polyacrylamide gel electrophoresis agarose electrophoresis کے مقابلے میں قدرے زیادہ حساس ہے، اور نمونے کی لوڈنگ کو مناسب طریقے سے کم کیا جا سکتا ہے۔

● ڈی این اے خراب ہو گیا تھا۔ نیوکلیز آلودگی سے بچیں۔

● ڈی این اے کو جیل سے الیکٹروفورس کیا گیا تھا۔ جیل کو کم وقت کے لیے الیکٹرو فوریز کریں، کم وولٹیج استعمال کریں، یا زیادہ فیصد جیل استعمال کریں۔

● ایتھیڈیم برومائیڈ کے داغ والے DNA کے تصور کے لیے غلط W روشنی کا ذریعہ استعمال کیا گیا تھا۔ زیادہ حساسیت کے لیے شارٹ ویو لینتھ (254 این ایم) ڈبلیو لائٹ استعمال کریں۔

4. ڈی این اے بینڈ غائب ہیں۔

●چھوٹے سائز کے ڈی این اے کو جیل سے الیکٹروفورس کیا گیا تھا۔ جیل کو کم وقت کے لیے الیکٹرو فوریز کریں، کم وولٹیج استعمال کریں، یا زیادہ فیصد جیل استعمال کریں۔

● ملتے جلتے مالیکیولر کے ڈی این اے بینڈز میں فرق کرنا مشکل۔ الیکٹروفورسس کے وقت میں اضافہ کریں، اور حراستی کو چیک کریں۔اس بات کو یقینی بنانے کے لیے کہ جیل کا فیصد درست طریقے سے استعمال کیا جائے۔

● ڈی این اے کو منقطع کر دیا گیا تھا۔ الیکٹروفورسس سے پہلے گرم نہ کریں۔ بفر میں DNA کو 20 mM NaCl کے ساتھ پتلا کریں۔

● DNA اسٹرینڈز بہت بڑے ہیں، اور روایتی جیل الیکٹروفورسس مناسب نہیں ہے۔ پلس جیل الیکٹروفورسس پر تجزیہ کریں۔ایگرز جیل الیکٹروفورسس کے ساتھ آپ کو کیا دیگر مسائل کا سامنا ہے؟ ہم مستقبل میں گائیڈز کے لیے مزید تحقیق کریں گے۔

بیجنگ لیوئی بائیوٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ (لیوئی بائیوٹیک) چین میں الیکٹروفورسس سے متعلق مصنوعات پر توجہ مرکوز کرنے والی ایک خصوصی کمپنی ہے۔ اس کی کہانی 1970 میں شروع ہوتی ہے جب چین ابھی تک اصلاحات اور کھلنے کے وقت میں داخل نہیں ہوا تھا۔ سالوں کی ترقی کے ذریعے، Liuyi Bitotech کا اپنا برانڈ ہے، جو الیکٹروفورسس مصنوعات کے لیے گھریلو مارکیٹ میں Liuyi برانڈ کے نام سے جانا جاتا ہے۔

Liuyi برانڈ کی چین میں 50 سال سے زیادہ کی تاریخ ہے اور کمپنی پوری دنیا میں مستحکم اور اعلیٰ معیار کی مصنوعات فراہم کر سکتی ہے۔ سالوں کی ترقی کے ذریعے، یہ آپ کی پسند کے قابل ہے!

Liuyi Biotech کے افقی الیکٹروفورسس سیلز (ٹینک/چیمبرز) اچھی ظاہری شکل کے ساتھ اعلیٰ معیار کے ہیں۔ جیل ٹرے کے مختلف سائز کے ساتھ، وہ آپ کی مختلف تجرباتی ضروریات کو پورا کر سکتے ہیں۔ ہمارے پاس اپنی تکنیکی ٹیم اور فیکٹری ہے۔ ڈیزائن سے لے کر مینوفیکچرنگ تک، خام مال سے لے کر اہم حصوں تک، ہم پورے عمل کو کنٹرول کر سکتے ہیں۔ DYCP 31 سیریز DNA الیکٹروفورسس کے لیے ہے، جو ماڈل ہیں۔DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN، اورDYCP-31E. ان میں فرق جیل کے سائز اور قیمت ہیں۔ ہم اپنے صارفین کے لیے مکمل سائز کی مصنوعات فراہم کرتے ہیں۔ ماڈلDYCP-32Cسب سے بڑا جیل 250mm * 250mm بنا سکتا ہے۔

دریں اثنا، ہم اپنی الیکٹروفورسس پاور سپلائی کی تجویز کرتے ہیں۔DYY-6C،DYY-6DاورDYY-10Cہمارے الیکٹروفورسس سیلز (ٹینکس/چیمبرز) DYCP-31 اور 32 سیریز کے لیے۔

اگر آپ مصنوعات کے بارے میں مزید معلومات چاہتے ہیں، تو براہ کرم مزید معلومات حاصل کرنے کے لیے اس ویب سائٹ پر جائیں، اور ہمیں ای میل کے ذریعے ہم سے رابطہ کرنے میں خوش آمدید کہ آپ کیا چاہتے ہیں، اور دیکھیں کہ کیا ہم آپ کے لیے حل فراہم کر سکتے ہیں۔

ہمارے بارے میں مزید معلومات کے لیے، براہ کرم ہم سے ای میل کے ذریعے رابطہ کریں۔[ای میل محفوظ], [ای میل محفوظ].