دومکیت پرکھ (سنگل سیل جیل الیکٹروفورسس، ایس سی جی ای) ایک حساس اور تیز رفتار تکنیک ہے جو بنیادی طور پر انفرادی خلیوں میں ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان اور مرمت کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ "Comet Assay" نام دومکیت جیسی خصوصیت سے آیا ہے جو نتائج میں ظاہر ہوتا ہے: خلیے کا مرکزہ "سر" بناتا ہے، جب کہ ڈی این اے کے تباہ شدہ ٹکڑے ہجرت کر جاتے ہیں، جس سے دومکیت سے مشابہ "دم" بنتا ہے۔
اصول
دومکیت پرکھ کا اصول برقی میدان میں ڈی این اے کے ٹکڑوں کی منتقلی پر مبنی ہے۔ برقرار ڈی این اے سیل نیوکلئس کے اندر رہتا ہے، جب کہ خراب یا بکھرا ہوا ڈی این اے انوڈ کی طرف ہجرت کرتا ہے، جس سے دومکیت کی "دم" بنتی ہے۔ دم کی لمبائی اور شدت ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کی حد سے براہ راست متناسب ہے۔
طریقہ کار
- سیل کی تیاری: ٹیسٹ کیے جانے والے خلیوں کو کم پگھلنے والے ایگرز کے ساتھ ملایا جاتا ہے اور ایک یکساں تہہ بنانے کے لیے خوردبین کی سلائیڈوں پر پھیلایا جاتا ہے۔
- سیل لیسس: سلائیڈوں کو سیل کی جھلی اور نیوکلیئر جھلی کو ہٹانے کے لیے ایک لیسس محلول میں ڈبو دیا جاتا ہے، جس سے ڈی این اے ظاہر ہوتا ہے۔
- الیکٹروفورسس: سلائیڈوں کو الکلین یا غیر جانبدار حالات میں الیکٹروفورسس چیمبر میں رکھا جاتا ہے۔ خراب ڈی این اے کے ٹکڑے الیکٹرک فیلڈ کے زیر اثر مثبت الیکٹروڈ کی طرف ہجرت کرتے ہیں۔
- داغ لگانا: الیکٹروفورسس کے بعد، ڈی این اے کو دیکھنے کے لیے سلائیڈوں کو فلوروسینٹ ڈائی (جیسے ایتھیڈیم برومائیڈ) سے داغ دیا جاتا ہے۔
- مائکروسکوپک تجزیہ: فلوروسینس مائکروسکوپ یا خصوصی سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے، دومکیت کی شکلوں کا تجزیہ کیا جاتا ہے، اور پیرامیٹرز جیسے کہ دم کی لمبائی اور شدت کی پیمائش کی جاتی ہے۔
بائیو رینڈر سے تصویر
ڈیٹا تجزیہ
دومکیت پرکھ کے نتائج کا اندازہ کئی کلیدی پیرامیٹرز کی بنیاد پر کیا جاتا ہے:
- دم کی لمبائی: DNA کی منتقلی کے فاصلے کی نمائندگی کرتا ہے، جو DNA کے نقصان کی حد کو ظاہر کرتا ہے۔
- ٹیل ڈی این اے مواد: ڈی این اے کا وہ فیصد جو دم میں منتقل ہوتا ہے، جو اکثر ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کی مقداری پیمائش کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔
- زیتون کے دم کا لمحہ (OTM): ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کا زیادہ جامع پیمانہ فراہم کرنے کے لیے دم کی لمبائی اور دم DNA مواد دونوں کو یکجا کرتا ہے۔
درخواستیں
- جینٹوکسائٹی اسٹڈیز: دومکیت پرکھ سیل ڈی این اے پر کیمیائی مادوں، ادویات اور تابکاری کے اثرات کا اندازہ لگانے کے لیے بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے، جس سے یہ جینوٹوکسٹی ٹیسٹنگ کا ایک اہم ذریعہ ہے۔
- ماحولیاتی زہریلا: یہ جانداروں کے ڈی این اے پر ماحولیاتی آلودگی کے اثرات کا تجزیہ کرنے میں مدد کرتا ہے، ماحولیاتی نظام کی حفاظت کے بارے میں بصیرت فراہم کرتا ہے۔
- طبی اور طبی تحقیق: دومکیت پرکھ DNA مرمت کے طریقہ کار، کینسر، اور دیگر DNA سے متعلقہ بیماریوں کا مطالعہ کرنے میں استعمال ہوتا ہے۔ یہ ڈی این اے پر کینسر کے علاج جیسے ریڈیو تھراپی اور کیموتھراپی کے اثرات کا بھی جائزہ لیتا ہے۔
- فوڈ اینڈ ایگریکلچر سائنسز: کیڑے مار ادویات، خوراک میں اضافے اور دیگر مادوں کی حفاظت کا اندازہ لگانے اور جانوروں کے ماڈلز میں ان کے زہریلے اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
فوائد
- اعلی حساسیت: ڈی این اے نقصان کی کم سطح کا پتہ لگانے کی صلاحیت۔
- سادہ آپریشن: تکنیک سیدھی ہے، جو اسے ہائی تھرو پٹ اسکریننگ کے لیے موزوں بناتی ہے۔
- وسیع درخواست: یہ جانوروں اور پودوں کے خلیوں سمیت مختلف خلیوں کی اقسام پر لاگو کیا جا سکتا ہے۔
- مقدار درست کرنے کے چیلنجز: ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان پر کوالٹیٹیو ڈیٹا فراہم کرتے ہوئے، مقداری تجزیہ سافٹ ویئر اور تصویری تجزیہ کی تکنیکوں پر بہت زیادہ انحصار کرتا ہے۔
- تجرباتی حالات: نتائج الیکٹروفورسس ٹائم اور پی ایچ جیسے عوامل سے متاثر ہو سکتے ہیں، تجرباتی حالات پر محتاط کنٹرول کی ضرورت ہوتی ہے۔
حدود
ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان اور مرمت کا پتہ لگانے میں لچک اور اعلیٰ حساسیت کی وجہ سے دومکیت پرکھ بائیو میڈیکل ریسرچ، ماحولیاتی سائنس اور منشیات کی ترقی میں ایک انمول ٹول ہے۔ بیجنگ لیوئی بائیو ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ (لیوئی بائیو ٹیکنالوجی)دومکیت پرکھ کے لیے افقی الیکٹروفورسس چیمبر پیش کرتا ہے۔ کے بارے میں بات کرنے کے لئے ہم سے رابطہ کرنے میں خوش آمدیددومکیت پرکھپروٹوکول
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) نے ہماری اپنی پیشہ ور تکنیکی ٹیم اور R&D سنٹر کے ساتھ 50 سال سے زائد عرصے سے الیکٹروفورسس آلات کی تیاری میں مہارت حاصل کی ہے۔ ہمارے پاس ڈیزائن سے لے کر معائنہ تک قابل اعتماد اور مکمل پروڈکشن لائن، اور گودام کے ساتھ ساتھ مارکیٹنگ سپورٹ ہے۔ ہماری اہم مصنوعات الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر)، الیکٹروفورسس پاور سپلائی، بلیو ایل ای ڈی ٹرانسلومینیٹر، یووی ٹرانسیلومینیٹر، جیل امیج اینڈ اینالیسس سسٹم وغیرہ ہیں۔ ہم لیبارٹری کے لیے پی سی آر انسٹرومنٹ، ورٹیکس مکسر اور سینٹری فیوج جیسے لیب کے آلات بھی فراہم کرتے ہیں۔
اگر آپ کے پاس ہماری مصنوعات کی خریداری کا کوئی منصوبہ ہے، تو براہ کرم ہم سے رابطہ کرنے میں سنکوچ نہ کریں۔ آپ ہمیں ای میل پر پیغام بھیج سکتے ہیں۔[ای میل محفوظ]یا[ای میل محفوظ]، یا براہ کرم ہمیں +86 15810650221 پر کال کریں یا Whatsapp +86 15810650221، یا Wechat: 15810650221 شامل کریں۔
براہ کرم Whatsapp یا WeChat پر شامل کرنے کے لیے QR کوڈ اسکین کریں۔
پوسٹ ٹائم: ستمبر 20-2024