نمونے کی تیاری اورلوڈ ہو رہا ہے۔
زیادہ تر معاملات میں جیل کو اسٹیک کیے بغیر مسلسل بفر سسٹم کے استعمال کی وجہ سے، نمونوں میں مناسب ارتکاز اور چھوٹا حجم ہونا چاہیے۔ استعمال کریں aپائپیٹریزولوشن میں نمایاں کمی سے بچنے کے لیے 5-10 μg فی کنواں کے ساتھ آہستہ آہستہ نمونہ شامل کریں۔ جبلوڈنگ نمونہ، بجلی کی فراہمی کو بند کر دیا جانا چاہئے. نمونے میں انڈیکیٹر ڈائی (0.025% بروموفینول نیلا یا نارنجی) اور سوکروز (10-15%) یا گلیسرول (5-10%) ہونا چاہیے تاکہ اس کی کثافت میں اضافہ ہو، نمونے کو مرتکز کیا جا سکے اور پھیلاؤ کو روکا جا سکے۔ تاہم، بعض اوقات سوکروز یا گلیسرول الیکٹروفورسس کے نتائج میں U کے سائز کے بینڈ کا سبب بن سکتے ہیں، جس سے 2.5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone) کے استعمال سے بچا جا سکتا ہے۔
الیکٹروفورسس
الیکٹروفورسس کے لیے وولٹیج 5-15 V/cm ہے، عام طور پر تقریباً 10 V/cm۔ بڑے مالیکیولز کی علیحدگی کے لیے، وولٹیج کم ہونا چاہیے، عام طور پر 5 V/cm سے زیادہ نہیں ہونا چاہیے۔
داغ لگانا
فلوروسینٹ ڈائی ایتھیڈیم برومائڈ (ای بی) عام طور پر ایگروز جیل میں ڈی این اے بینڈ کا مشاہدہ کرنے کے لئے داغ لگانے کے لئے استعمال ہوتا ہے۔ ای بی ڈی این اے مالیکیولز کے بیس جوڑوں کے درمیان داخل کر سکتا ہے، جس کی وجہ سے ای بی ڈی این اے کے ساتھ جڑ جاتا ہے۔ DNA کے ذریعے 260 nm بالائے بنفشی روشنی کا جذب EB میں منتقل ہوتا ہے، اور پابند EB مرئی روشنی کے اسپیکٹرم کے سرخ اورینج خطے میں 590 nm پر فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ جیل کو 1 mmol/L MgSO4 محلول میں 1 گھنٹہ تک داغدار کرنے سے انباؤنڈ EB کی وجہ سے پس منظر کے فلوروسینس کو کم کیا جا سکتا ہے، جس سے DNA کی تھوڑی مقدار کا پتہ لگانے میں آسانی ہو گی۔
ای بی ڈائی کے کئی فائدے ہیں: یہ استعمال کرنا آسان ہے، نیوکلک ایسڈ کو نہیں توڑتا، زیادہ حساسیت رکھتا ہے، اور ڈی این اے اور آر این اے دونوں پر داغ لگا سکتا ہے۔ EB کو نمونے میں شامل کیا جا سکتا ہے اور کسی بھی وقت UV جذب کا استعمال کرتے ہوئے ٹریک کیا جا سکتا ہے۔ داغ لگنے کے بعد، EB کو n-butanol کے ساتھ نکال کر ہٹایا جا سکتا ہے۔
تاہم، ای بی ڈائی ایک طاقتور میوٹیجن ہے، اور احتیاطی تدابیر، جیسے پولی تھیلین کے دستانے پہننا، کو سنبھالنے کے دوران لیا جانا چاہیے۔ ایکریڈین اورنج بھی عام طور پر استعمال ہونے والا رنگ ہے کیونکہ یہ سنگل اسٹرینڈ اور ڈبل اسٹرینڈ نیوکلک ایسڈ (DNA، RNA) کے درمیان فرق کر سکتا ہے۔ یہ ڈبل سٹرینڈڈ نیوکلک ایسڈز کے لیے گرین فلوروسینس (530 nm) اور سنگل سٹرینڈ نیوکلک ایسڈز کے لیے ریڈ فلوروسینس (640 nm) کی نمائش کرتا ہے۔ مزید برآں، دیگر رنگوں جیسے میتھیلین بلیو، میتھیلین گرین، اور کوئنولین بی کو داغ لگانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) نے ہماری اپنی پیشہ ور تکنیکی ٹیم اور R&D سنٹر کے ساتھ 50 سال سے زائد عرصے سے الیکٹروفورسس آلات کی تیاری میں مہارت حاصل کی ہے۔ ہمارے پاس ڈیزائن سے لے کر معائنہ تک قابل اعتماد اور مکمل پروڈکشن لائن، اور گودام کے ساتھ ساتھ مارکیٹنگ سپورٹ ہے۔ ہماری اہم مصنوعات الیکٹروفورسس سیل (ٹینک/چیمبر)، الیکٹروفورسس پاور سپلائی، بلیو ایل ای ڈی ٹرانسلومینیٹر، یووی ٹرانسیلومینیٹر، جیل امیج اینڈ اینالیسس سسٹم وغیرہ ہیں۔
اب ہم شراکت داروں کی تلاش میں ہیں، OEM الیکٹروفورسس ٹینک اور تقسیم کار دونوں کا خیرمقدم کیا جاتا ہے۔
اگر آپ کے پاس ہماری مصنوعات کی خریداری کا کوئی منصوبہ ہے، تو براہ کرم ہم سے رابطہ کرنے میں سنکوچ نہ کریں۔ آپ ہمیں ای میل پر پیغام بھیج سکتے ہیں۔[ای میل محفوظ]یا[ای میل محفوظ]، یا براہ کرم ہمیں +86 15810650221 پر کال کریں یا Whatsapp +86 15810650221، یا Wechat: 15810650221 شامل کریں۔
براہ کرم Whatsapp یا WeChat پر شامل کرنے کے لیے QR کوڈ اسکین کریں۔
پوسٹ ٹائم: دسمبر-20-2023